1、加强门户管理，加强手术间的门户管理制度，准备充分，尽量减少进出房间的次数，并随手关门，术中严禁门户敞开，防止污染空气进入。限制人员流动，据统计，人体在静坐时每分钟可散布尘埃数为105个，轻微活动时约为106个，快速步行时则是107个。另一方面，根据监测证实，手术室浮游菌降落的数量在手术过程中有变化，其特点为：手术开始时细菌降落量最大，结束时又出现一个峰值。禁止患病人员参与手术，患有呼吸道感染、疖、痈或手部有破溃的医务人员不得参与手术和进入手术室。
2、防止空气污染，手术间内空气的污染主要来源于人的生理、病理分泌。每次呼气，尤其是打喷嚏，均会释放出大量飞沫；人的体表也时刻脱落着难以记数的皮屑。不管是飞沫还是皮屑均可携带大量细菌，它们会随气流到处漂浮并扩散。为保证室内空气洁净，尤其是防止细菌直接落入切口或手术器械，工作人员进入室内前必须戴好口帽，有效遮盖口鼻，避免大声交谈、打喷嚏；所穿衣物材料以不脱纤维、不落尘为宜。
3、做好术前准备，患者术前一日尽可能沐浴，进人手术室前应脱去鞋袜，换穿清洁衣裤并戴帽子。手术前脱去衣裤，减少患者在手术台上的翻动，有必要翻动患者盖被时尽量轻柔，在安置完患者手术体位后方可开启无菌包，以免带菌漂浮物沉降于无菌区内。无菌手术与污染手术必须分室；无条件者应先进行无菌手术；接台手术之间要严格环境净化和湿式打扫；手术人员在两台之间也应重新刷手、穿戴手术衣。
